簡要描述:快速封閉液(即用型,免洗)是一款無蛋白成分快速 Western Blot 的封閉液, 可用于高效快速的封閉轉(zhuǎn)膜后的 NC 或 PVDF 膜,可替代脫脂奶粉、BSA 等傳統(tǒng)封閉液,通用于常規(guī)抗體、磷酸化抗體、生物*標(biāo)記抗體。
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品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號 | AP36L108 |
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品描述
快速封閉液 (即用型,免洗)(以下簡稱“快封液")是一款無蛋白成分快速 Western Blot 的封閉液, 可用于高效快速的封閉轉(zhuǎn)膜后的 NC 或 PVDF 膜,可替代脫脂奶粉、BSA 等傳統(tǒng)封閉液,通用于常規(guī)抗體、磷酸化抗體、生物*標(biāo)記抗體。
使用本產(chǎn)品,整個封閉過程僅需 10min,無需洗滌,即可直接孵育一抗;總體優(yōu)于傳統(tǒng)的基于BSA (牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白 (Casein) 等的封閉液及國外同類產(chǎn)品。
本產(chǎn)品配制在 TBST中,含0.1% TWEEN20 。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
快速封閉液(即用型,免洗) | AP36L108 | 500mL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。4℃保存,有效期12個月。
使用方法
Western Blot 中膜的封閉
完成轉(zhuǎn)膜后,用 Western 洗滌液洗滌蛋白膜 1-2 min 。
根據(jù)膜的大小,將一定體積的快封液倒入平皿或者其它適當(dāng)容器中,確保封液后續(xù)能充分覆蓋膜即可。對于常規(guī)的 western,一張約 6.6×8.5cm 的膜推薦使用約 10mL 左右的快封液。
用平頭鑷夾住膜的一角,將膜放置在 WB 無蛋白封閉液(1 X in TBST)中,使封閉液浸沒膜,置于水平搖床上封閉約 10 min(經(jīng)多種抗體的測試封閉 10 min的效果很多時候會顯著優(yōu)于常規(guī)的 BSA封閉 1 h的效果)。
封閉后的膜即可用于一抗孵育等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
本產(chǎn)品推薦僅使用一次,重復(fù)使用可能會導(dǎo)致封閉效果下降。但對于一些信噪比很高的一抗,例如一些內(nèi)參抗體,快封液可以重復(fù)使用 2-3 次。回收的快封液請勿與未使用過的快封液混合。
通常本產(chǎn)品用于 PVDF 膜及 NC 膜時的封閉時間為 10 min。對于一些背景非常高的抗體,可以嘗試將封閉時間延長為30-60 min。此外,如有特殊需要,也可以 4oC 封閉過夜。
由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實(shí)驗(yàn)體系的,因此對于一些特殊的實(shí)驗(yàn),可能需要根據(jù)具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。
取放 PVDF 膜和 NC 膜應(yīng)使用平頭鑷子,并僅輕輕夾取其邊角,操作過程須避免膜表面產(chǎn)生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。
PVDF 膜一經(jīng)浸潤和活化,需一直保持濕潤,根據(jù) Western 進(jìn)行到的具體步驟可放置于 western 轉(zhuǎn)膜液或洗滌液等適當(dāng)溶液中,否則可能會產(chǎn)生難以封閉的異常背景。
僅用于封閉使用,不可用于一抗二抗稀釋。
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