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當前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > PCR&q-PCR > 直擴PCR > AN11L217、AN11L218一站式鼠尾基因快速鑒定試劑盒

一站式鼠尾基因快速鑒定試劑盒

簡要描述:一站式鼠尾基因快速鑒定試劑盒適用于從鼠尾、鼠耳、腳趾或其它組織快速提取基因組DNA,并進行PCR擴增,從而實現(xiàn)快速、便捷且準確的小鼠基因型鑒定(genotyping)及基因組的相關分析。

  • 產(chǎn)品型號:AN11L217、AN11L218
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-09-05
  • 訪  問  量:235

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細介紹

品牌Life-iLab/李記生物供貨周期現(xiàn)貨
應用領域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

一站式鼠尾基因型快速鑒定試劑盒適用于從鼠尾、鼠耳、腳趾或其它組織快速提取基因組DNA,并進行PCR擴增,從而實現(xiàn)快速、便捷且準確的小鼠基因型鑒定(genotyping)及基因組的相關分析。

本試劑盒可在10-15 min內(nèi)快速消化和提取鼠尾組織樣品的基因組DNA,有效簡化了鼠尾基因組DNA獲取過程。本試劑盒還提供了預配制的2X PCR Master Mix (Green),內(nèi)含Taq DNA Polymerase,PCR Buffer,dNTP和上樣緩沖液,只需加入適量引物、模板和水即可進行PCR擴增。PCR結束后,產(chǎn)物可直接進行電泳分析,方便快捷。

推薦組織用量

3~5mm2 小鼠尾尖 (2~3mm)

5~10mm2小鼠耳朵 (3~5mm)

1個小鼠腳趾

訂購信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

一站式鼠尾基因快速鑒定試劑盒(Direct Mouse Genotyping Kit)

AN11L217

200 T

一站式鼠尾基因快速鑒定試劑盒(Direct Mouse Genotyping Kit)

AN11L218

500 T

產(chǎn)品組分

組分

AN11L217

AN11L218

保存條件

A.  DNA extraction solution

15 mL

40 mL

室溫

B.  Stop solution

15 mL

40 mL

室溫

C.  2X PCR Master Mix

3*1 mL

8*1 mL

-20℃

運輸與保存

藍冰運輸。組分按照保存條件保存,有效期12個月。

使用方法

1.   基因組提取步驟:

(1) 向每個樣本中加入70 μL DNA extraction solution,確保組織浸沒在溶液中。

(2) 在95℃的金屬浴或水浴中裂解處理10-15 min。裂解完成后,組織在外觀上仍然保持完整,但足量的基因組DNA已成功釋放,不影響后續(xù)的PCR實驗。

(3) 裂解后,短暫離心去除管蓋內(nèi)壁的液滴,然后在室溫下靜置2 min。隨后加入70 μL終止液(Stop solution),輕輕混勻,終止裂解反應。

(4) 12000 rpm離心2 min,取上清液作為PCR模板。上清液在消化后可在4℃保存一個月,或在-20℃下保存一年。

2.   PCR擴增步驟:

(1) 將2X PCR Master Mix(Green)置于冰浴或冰盒內(nèi),并準備PCR反應所需的引物、模板和水。

(2) 參考表1,在冰浴上配制PCR反應體系。

(3) 使用移液器輕輕吹打或輕微漩渦混合(Vortex)以確保充分混勻。隨后,在室溫下短暫離心幾秒鐘,使液體集中于管底。

(4) 將配制好的PCR反應體系放置在PCR儀中,啟動PCR反應。

(5) 可參考表2設置PCR反應程序參數(shù)。PCR反應結束后,可直接進行瓊脂糖凝膠電泳。

表1:PCR反應體系

成分

用量

Template

2 μL

Forward Primer (10 μM)

0.5 μL

Reverse  Primer (10 μM)

0.5 μL

2x PCR Master Mix

10 μL

ddH2O

7 μL

Total

20 μL

表2:PCR反應程序設定

步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94 ℃

2 min

1

變性

94 ℃

30s

30~35

退火

55 ℃

30s

延伸

72 ℃

30s (1kb/min)

終延伸

72 ℃

10 min

1

臨時保存

4 ℃

forever

注意事項

1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

2. PCR產(chǎn)物少或沒有條帶。引物設計不佳是最常見的問題,需合理優(yōu)化引物;在室溫下配置反應體系易引發(fā)非特異性擴增,建議在冰浴中進行;退火溫度不當可能影響結果,建議使用溫度梯度PCR儀優(yōu)化,或通過多次PCR反應找到最佳溫度;延伸時間不足。建議每1 kb片段延伸1 min,難以擴增的片段可延長至1.5-2 min。

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