簡要描述:0.25胰*白酶消化液(含EDTA,含酚紅)含 0.25%胰*白酶,溶于 Hank’s 緩沖液,添加 0.9 mM EDTA,含酚紅指示劑,經(jīng) 0.22 μm 過濾除菌。*酶在 37℃ pH 8.0 條件下消化能力*。常用*酶工作濃度為 0.25%。EDTA 可以螯合鈣鎂離子,*酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種 pH 指示劑,溶液偏堿性時呈
產(chǎn)品分類
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC15L811 |
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規(guī)格 | 100 mL | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
胰*白酶(Trypsin)簡稱*酶,是一種絲*酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精*酸殘基中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng),以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過程中,均會使用到胰*白酶消化液,用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì),使組織或細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。
*酶在 37℃ pH 8.0 條件下消化能力*。常用*酶工作濃度為 0.25%。EDTA 可以螯合鈣鎂離子,*酶溶液中搭配 EDTA 使用可以加速細(xì)胞間連接蛋白的水解,起到增強消化的效果。酚紅是一種 pH 指示劑,溶液偏堿性時呈紫紅色,偏酸性時呈橘紅色,近中性時呈粉紅色。
本產(chǎn)品含 0.25%胰*白酶,溶于 Hank’s 緩沖液,添加 0.9 mM EDTA,含酚紅指示劑,經(jīng) 0.22 μm 過濾除菌。
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
0.25%胰*白酶消化液(含EDTA,含酚紅) | AC15L811 | 100 mL |
運輸與保存
藍(lán)冰運輸。-20℃保存,有效期12個月。【注】:避免反復(fù)凍融。
使用方法
吸去細(xì)胞培養(yǎng)液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞去除殘余的血清。
加入適量本產(chǎn)品覆蓋細(xì)胞,室溫靜置消化 1-5 min。(不同細(xì)胞消化時間不同)
顯微鏡下觀察,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮,用移液槍輕輕吹打細(xì)胞較容易將細(xì)胞吹打下來時,吸除*酶細(xì)
胞消化液,加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液,輕輕吹打下細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,即可直接傳代培養(yǎng)。【注】:如果用移液槍輕輕吹打時很難使細(xì)胞從板底脫落,表明消化時間不夠,可加入*酶細(xì)胞消化液重新消化。切忌避免過度消化。
注意事項
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同,實驗人員應(yīng)依據(jù)具體情況,確定最佳消化時間;消化細(xì)胞時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況。
本產(chǎn)品不含抑菌劑,在使用過程中要特別注意無菌操作,避免消化液被微生物污染。
本產(chǎn)品不宜 4℃長期保存,避免反復(fù)凍融,建議分裝成小份后-20℃保存。
對于*酶中 EDTA、酚紅的選擇,可以根據(jù)實驗需要,對于一般的腫瘤細(xì)胞,選擇含 EDTA 的*酶消化液。對于較敏感、脆弱的細(xì)胞,例如原代細(xì)胞及很容易消化的細(xì)胞,選擇不含 EDTA 的*酶消化液,如果細(xì)胞特別敏感,需要選擇胰*白酶濃度更低的消化液。如果是需要用于流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,則選用不含 EDTA 的*酶消化液。
由于 Hank’s 溶液中 NaHCO3 含量較低,不建議將本產(chǎn)品用于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中消化,如果放入 CO2相,溶液會迅速變酸性。
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