紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細(xì)胞,它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化,淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。
原理說明
利用細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異,形成滲透壓差,外部的水分會擴(kuò)散至細(xì)胞內(nèi),使紅細(xì)胞膨脹,達(dá)到裂解的效果。
使用方法
1.裂解紅細(xì)胞
(1) 向 1 份待裂解的新鮮全血中加入 3 倍體積的紅細(xì)胞裂解液(如 1mL 新鮮全血加入 3mL 紅細(xì)胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻?!咀ⅰ浚喝绻麑π迈r組織細(xì)胞進(jìn)行處理需經(jīng)胰酶等消化成單個(gè)細(xì)胞懸液后離心收集細(xì)胞后再進(jìn)行后續(xù)操作。
(2) 冰上孵育 15 min,其間輕輕渦旋混勻 2 次。【注】:紅細(xì)胞裂解后,溶液應(yīng)該是清亮透明的。
2.收集白細(xì)胞
(1)在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞,小心吸棄上清液。
(2) 向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細(xì)胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細(xì)胞(例如起始血液為 1 mL,則加入 2 mL 的紅細(xì)胞裂解液)。
(3) 在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細(xì)胞,小心并吸去上清液。
(4) 重懸細(xì)胞,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)?!咀ⅰ浚喝缣崛?RNA,最好從此步開始使用無 RNase 的溶液進(jìn)行。
紅細(xì)胞裂解液產(chǎn)品
[名稱] 李記生物
[名稱] 紅細(xì)胞裂解液
[貨號] AP01L106
[規(guī)格] 100mL
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