Western Blot (WB) 是分子生物學(xué)中常用的一種技術(shù),主要用于檢測(cè)特定蛋白在樣本中的存在與表達(dá)水平。封閉液的主要作用是阻止一抗和二抗的非特異性結(jié)合,這對(duì)于減少背景噪音、提高信號(hào)對(duì)比度至關(guān)重要。沒有適當(dāng)?shù)姆忾],即便是最jing細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)也可能因高背景信號(hào)而受到影響,導(dǎo)致數(shù)據(jù)解讀困難。
快速封閉液介紹
快速封閉液(即用型,免洗)是一款無蛋白成分快速 Western Blot 的封閉液,可用于高效快速的封閉轉(zhuǎn)膜后的 NC 或 PVDF 膜,可替代脫脂奶粉、BSA 等傳統(tǒng)封閉液,通用于常規(guī)抗體、磷酸化抗體、生物素標(biāo)記抗體。其次整個(gè)封閉過程僅需10min,無需洗滌,即可直接孵育一抗;總體效果xian著優(yōu)于傳統(tǒng)的基于牛血清白蛋白、脫脂奶粉、酪蛋白 等的封閉液及國外同類產(chǎn)品。
快速封閉液特點(diǎn)
? 即用型封閉液,無需配制
? 封閉時(shí)間短,僅需10分鐘
? 背景低,信噪比高,優(yōu)于常規(guī)封閉的效果
? 不含哺乳動(dòng)物來源的蛋白,適用于磷酸化的抗體
快速封閉液實(shí)驗(yàn)步驟
① 完成轉(zhuǎn)膜后,用Western洗滌液洗滌蛋白膜1-2 min 。
② 根據(jù)膜的大小,將一定體積的快封液倒入平皿或者其它適當(dāng)容器中,確保封液后續(xù)能充分覆蓋膜即可。對(duì)于常規(guī)的 western,一張約 6.6×8.5cm 的膜推薦使用約 10mL 左右的快封液。
③ 用平頭鑷夾住膜的一角,將膜放置在 WB 無蛋白封閉液(1 X in TBST)中,使封閉液浸沒膜,置于水平搖床上封閉約 10 min(經(jīng)多種抗體的測(cè)試封閉 10 min的效果很多時(shí)候會(huì)顯著優(yōu)于常規(guī)的BSA封閉1 h的效果)。
④ 封閉后的膜即可用于一抗孵育等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
快速封閉液產(chǎn)品推薦
[品牌] 和元李記生物
[產(chǎn)品] 快速封閉液(即用型,免洗)
[貨號(hào)] AP36L108
[規(guī)格] 500mL
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